Ինչ է PCR վերլուծությունը:
Պոլիմերազի շղթայի ռեակցիան (ՊՇՌ) վերլուծություն է լաբորատոր տեխնիկան, որը նախատեսված է որպես փոքրիկ քանակի ԴՆԹ-ի նմուշում, որպես ուժեղացում հայտնի որպես գործընթաց: PCR- ի ուժեղացման ընթացքում, հետաքրքրության ԴՆԹ-ն բազմիցս պատճենահանվում է, քանի դեռ բավարար է այն վերլուծության եւ հայտնաբերման համար: Օրինակ, PCR- ը կարող է օգտագործվել օրգանիզմների փոքր քանակությամբ ԴՆԹ-ի հայտնաբերման համար, որոնք առաջացնում են նյարդային նմուշում առկա գոնորիա կամ քլամիդիա :
Ինչպես է ՊՇՌ-ն աշխատում:
PCR- ի առաջին քայլը նմուշը ջերմացնում է, որպեսզի երկկողմանի ԴՆԹ-ն բաժանվի երկու միասնական շերտերին, այսինքն ` denaturation : Դրանից հետո ԴՆԹ-ի կարճ նմուշները, որոնք համապատասխանում են հետաքրքրության ԴՆԹ-ի հաջորդականության ծայրերին, համակցված են նմուշային ԴՆԹ-ի հետ: Դրանից հետո ԴՆԹ - ի պոլիմերազը օգտագործվում է ԴՆԹ-ի կրկնօրինակը սկսելու համար: Վերջիվերջո, ԴՆԹ-ն ջերմացվում է, որպեսզի մեկ անգամ եւս բաժանեն շերտերը, եւ ամբողջ PCR գործընթացը նորից սկսվի:
Նմուշի ներգրավված հետաքրքրության ԴՆԹ-ի հատվածի գումարը մեծացնում է յուրաքանչյուր PCR ցիկլով `մեկական օրինակ, դառնում է երկու, ապա դառնում է չորս, ապա դառնում է ութ, եւ այլն: այնպես որ, ընդհանուր առմամբ, անհրաժեշտ է ընդամենը 20-40 ցիկլեր, որոշելու համար, թե արդյոք առկա է ԴՆԹ-ն (եւ, եթե դա այն է, բավարար վերլուծության համար վերլուծության համար):
Պոլիմերազի շղթայի ռեակցիայի բոլոր փուլերը `ԴՆԹ-ի դինատուրալը , պրոտեները կիրառելը եւ ԴՆԹ-ն երկարաձգելը, տարբեր ջերմաստիճաններում տեղի են ունենում, այնպես որ նախնական խառնուրդից հետո այն կարող է վերահսկվել որպես ջերմոցիկլինգ , որի ընթացքում ջերմաստիճանը պահվում է անհրաժեշտ մակարդակով, բավականաչափ երկար, յուրաքանչյուր քայլի համար:
Այսպիսով, PCR- ն հանդիսանում է մեկ փորձարկման խցիկում թիրախային ԴՆԹ-ի չափի ուժեղացման արդյունավետ միջոց, որը մարդկային միջամտության կարիք չունի:
Պոլիմերազի շղթայական ռեակցիան ներկայացրեց հեղափոխությունը կենսաբանական տեխնիկայի մեջ, երբ այն մշակվել էր 1980-ականների սկզբին, եւ PCR- ի ստեղծող Կարի Մուլլիսը 1993 թ. Իր աշխատանքի համար արժանացել է Քիմիայի Նոբելյան մրցանակին:
Ինչու է ՊՇՌ-ն համապատասխանում STD- ի փորձարկմանը:
Պոլիմերազի շղթայի ռեակցիան եւ նմանատիպ տեխնիկան, ինչպիսիք են լիպազի շղթայական ռեակցիան , ապացուցում են, որ STD- ի փորձարկման համար մեծ նշանակություն ունի: Սա է պատճառը, որ այդ մեթոդները կարող են ուղղակիորեն բացահայտել նմուշներում փոքր քանակությամբ վիրուսային ԴՆԹ կամ ՌՆԹ: Պաթոգենի գենետիկ կոդերի հայտնաբերումը չի պահանջում պաթոգենին կենդանի լինել, ինչպիսին է բակտերիալ մշակույթը կամ վիրուսային մշակույթը : Այն նաեւ չի պահանջում վարակի առաջացման համար բավական երկար ժամանակ առաջ մարդիկ հայտնաբերել հայտնաբերելի հակամարմինների արձագանք (օրինակ, ELISA- ի կողմից հայտնաբերված): Սա նշանակում է, որ PCR մեթոդները երբեմն կարող են հայտնաբերել հիվանդությունները վաղուց, քան մյուս թեստերը, եւ առանց որքան անհրաժեշտ է անհանգստանալ նմուշների կենդանի պահելու կամ ճիշտ ժամանակին փորձարկելու հարցում: